Characterization and Purification of Alkaline Proteases From Viscera of Silver Carp (Hypophthalmichthys molitrix) Fish

Atta, M. B.; Abd El-Hamed, Shimaa El-Said; Keshk, Samia A.

doi:10.21608/ajas.2017.7572

Characterization and Purification of Alkaline Proteases From Viscera of Silver Carp (Hypophthalmichthys molitrix) Fish

Document Type : Original Article

Authors

¹ Food Science and Technology Department, Faculty of Agriculture, Tanta University

² Food Science and Technology Institute, Agriculture Research Center, Ministry of Agriculture

10.21608/ajas.2017.7572

Abstract

Proteases from viscera of Silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) fish have been extracted and characterized. The alkaline proteases show optimum activity in 0.2M Tris-HCl buffer at pH 8.5 and 45°C using soluble milk casein as substrate. The crude alkaline protease lost about 35% or 51% of its specific activity if it was heated at 50°C or kept at pH 9 for 60 min., respectively. Purification of proteases purified by ammonium sulfate precipitation, gel-filtration using Sephadex G 50 column and ultrafiltration via polyamide membrane (30 KDa) led to increase its specific activity up to 20, 24 and 99 fold, respectively.

Keywords

Main Subjects

Food Science & Technology

Article Title [العربیة]

استخلاص وتنقیة الأنزیمات البروتینیه من أحشاء سمک المبروک الفضى

Authors [العربیة]

محمد بسیم عطا ¹
شیماء السید عبد الحمید ²
سامیة عبد الحمید کشک ²

¹ قسم علوم وتکنولوجیا الأغذیة- کلیة الزراعة - جامعة طنطا

² معهد بحوث تکنولوجیا الأغذیة- مرکز البحوث الزراعیة- وزارة الزراعة

Abstract [العربیة]

تم استخلاص الانزیمات البروتینیة من أحشاء سمک المبروک الفضى و درست خواص الأنزیم (افضل بفر- تقدیر الأس الهیدروجینی الأمثل- تقدیر درجة الحرارة المثلی- تقدیر ترکیز الأنزیم الأمثل....الخ), کما اجریت عملیات تنقیة الأنزیم الخام بأستخدام التقنیات المختلفة (الترسیب باملاح کبریتات الأمونیا و السریان على عمود جیل G50واستخدام غشاء 30 کیلودالتون) و قد بینت النتائج المتحصل علیها أن أعلی نشاط للأنزیم کان باستخدام بفرTris-HCl عندالأس الهیدروجینی 8.5 (pH8.5) و درجة حرارة 45 م° باستخدام الکازین کمادة تفاعل. کذلک فقدت الانزیمات 35٪ و 51 ٪ من نشاطها عند التحضین على درجة حرارة 50^◦م و أس هیدروجینی 9 (pH 9)لمدة 60 دقیقةعلى التوالى. أما بالنسبة لتنقیة الأنزیم فقد اظهرت النتائج أن الترسیب بأملاح الأمونیوم والترشیح بالجل تزید نشاط الأنزیم الخام الی 20 و 24 ضعفا على التوالى. أما تنقیة الأنزیم بواسطة الترشیح الفائق باستخدام غشاء البولی امید یزید نشاط الأنزیم الی 99 ضعفا.

Keywords [العربیة]